采用乳酸链球菌发酵生产Nisin,是获得Nisin的途径。本文对本实验室保存的乳酸链球菌MEN105菌株进行了培养基和发酵条件优化。首先采用单因素试验方法,找到了碳源、氮源、磷源和无机盐等种类的较适因素水平,运用均匀设计进一步优化Nisin发酵培养基,得到的Nisin最适发酵培养基(g/100mL)为:蔗糖2.93,大豆蛋白胨1.0,酵母膏0.43,Na_2HPO_4为1.89,MgSO_4·7H_2O 0.02。比出发培养基效价提高了35.8%。采用单因素实验方法对培养条件进行了优化,确定了最适的Nisin发酵条件:灭菌前培养基pH调至7.5,150mL三角瓶装20mL,30℃培养24h。 在3L自动控制发酵罐中,比较了自然pH分批发酵和恒pH 6.5分批发酵。通过控制pH发酵,削弱了发酵过程中产生乳酸导致pH下降对发酵的,Nisin发酵效价比自然pH发酵提高了21.9%。
通过不同初始糖浓度发酵过程的比较,发现高糖浓度会对乳酸链球菌发酵产生底物,并且延长发酵周期。因此,确定对乳酸链球菌进行补糖发酵,以1%蔗糖浓度作为初始糖浓度,在以上基础上,考察补糖发酵对Nisin产量的影响。