原理
在碱性溶液中,酚类化合物可以将钨钼酸还原(W6+变为W5+),生成蓝色的化合物,颜色的深浅与多酚含量呈正相关,蓝色化合物在760nm处有最大吸收峰。
操作程序
称取适量的葡萄籽提取物,用水溶解,浓度在0.1mg/mL左右。取1mL样品液加到10mL比色管中,然后依次加入1mL去离子水、0.5mL Folin- Ciocalteau试剂、1.5mL 26.7% Na2CO3溶液,最后用水定容至10mL,室温下反应2小时,在760nm下测定其吸光度。
以没食子酸作为对照品,配制不同浓度的溶液,按上述方法反应,测得吸光度。以吸光度对浓度绘制标准曲线。由标准曲线可求得提取物中总多酚的含量(以相当于没食子酸的含量表示)。
美国葡萄籽方法评定委员会同意采用此种方法来测定葡萄籽提取物中的总多酚,但同时建议此方法还需进一步完善,以确认单体和原花青素同Folin- Ciocalteau试剂反应的差异。