研究发现,在众多的植物组织中,葡萄籽与松树皮提取物中原花青素的含量,而从葡萄籽中提取原花青素的方法主要有溶剂提取法、微波浸提法 、超声提取法和超临界CO2萃取法等。葡萄籽原花青素提取物中含有很多杂质,需进一步纯化才能提高原花青素的纯度,常用的纯化方法有溶剂萃取、膜过滤及色谱法。
乙醇浓度对葡萄籽原花青素提取率的影响,提取时间和温度对葡萄籽原花青素提取率的影响都不。其提取工艺参数为:乙醇浓度70%,提取时间120min,料液比1 : 20。
称取适量的葡萄籽提取物(约10~ 30mg)用甲醇溶解,最后定溶于100mL。从中取1mL样品溶液加到10mL比色管中,然后依次加入6mL盐酸-正丁醇(5/95,V/V),0.2mL 2.0%硫酸铁铵溶液(用2mol.L-1的盐酸溶解),在97℃下反应40min后,取出迅速冷却,在550nm处测定其吸光度,以甲醇代替提取物溶液作为空白。
PVU = A × 7.2/W。A:吸光度;W:样品质量(g)。
美国葡萄籽方法评定委员会认为葡萄籽提取物的PVU在250~ 350之间是比较理想的。PVU过低,可能说明该产品中原花青素的含量较低;PVU过高,说明该产品中高聚体原花青素含量较高。但由于porter法不能区分测出的是何种原花青素,所以若一种葡萄籽提取物测出的PVU为300,则该产品可能是低聚体原花青素含量较多,也可能是单体和高聚体原花青素含量较多。