嗜热菌蛋白酶(thermolysin)已成功用于有机相中阿斯巴甜前体的合成,它使苯丙氨酸甲酯与氨基保护的天冬氨酸缩合形成阿斯巴甜前体,再经还原、脱保护基,即可得到阿斯巴甜。酶法催化的反应具有对映体选择性,只合成α-阿斯巴甜,反应中可以采用外消旋体苯丙氨酸甲酯作为底物,酶催化反应时只利用L-苯丙氨酸甲酯,未反应的D-苯丙氨酸甲酯可形成盐,酸化后可使之外消旋化而循环利用。
该催化反应具有以下特色:①利用了耐有机溶剂的嗜热菌蛋白酶;②利用非水相体系,提高了底物浓度;③嗜热菌蛋白酶对DL-苯丙氨酸甲酯中L-苯丙氨酸甲酯具有严格的选择性,可以利用廉价的外消旋体作为原料;④将嗜热菌蛋白酶与合成原料置于水相中进行酶促反应,生成的中间体则随时被萃取到有机相中。因此,酶促反应不受抑制,可连续进行,产率超过95%。