黑曲霉发酵高浓度蔗糖法
以蔗糖为基质进行发酵生产时,当基质蔗糖浓度低于0.5%,倾向于水解反应,主要生成葡萄糖和果糖;当基质蔗糖浓度提高到50%时,只有转移反应而不发生水解反应,低聚果糖的收率可超过60%。首先,将筛选出的高酶活黑曲霉株接种于浓度为5%-10%的蔗糖液培养基中,在28-30℃下振摇培养2-4d,获得具有较高果糖转移酶活性的黑曲霉菌体。为了有利于酶活性的提高,在培养基中可适当添加氮源物质(如蛋白胨和NH4 NO3,0.5%-0.75%)及无机盐(如MgSO4和KH2PO4,0.1%-0.15%),再将这些菌体作用于50%~60%蔗糖溶液,在一定温度和pH下催化产生低聚果糖。反应结束后,发酵液的组成为:葡萄糖(36%-38%)、蔗糖(10%-12%)、果寡三糖(21%-28%)、果寡四糖(21%-24%)、果寡五糖(3%-6%),低聚果糖55%-60%。该法虽然使果寡糖产率得到大幅度提高,工艺设备简单,但酶无法重复利用,自动化程度低,因而生产成本较高。