谷胱甘肽检测方法较多,比较常用的有碘量法、DTNB(Ellman试剂)法、亚硝基铁氰化钠法、荧光法、四氧嘧啶法和高效液相色谱法( HPLC)。上述方法各有优点,在检测GSH含量时可根据实际情况,选择适合、灵敏、的检测方法。
DTNB比色法
原理:DTNB与谷胱甘肽的巯基反应生成黄色的5 - 硫代 - 2 - 硝基苯甲酸,在412 nm波长处有最大吸收峰,而DTNB在400nm以上几乎没有吸收峰。向含有谷胱甘肽的试样中加入少量的DTNB,将反应液在412 nm处测定吸收值,根据吸收值的大小即可求得谷胱甘肽含量。
方法步骤:
1、DTNB贮存液配制:将0.01 mol/L的DTNB溶解于0.05 mol/L的磷酸缓冲液(pH7.0)中形成DTNB贮存液