甘露聚糖酶液
菌种采用芽孢杆菌WY-45,为本实验室保存。培养基成分(质量浓度,g/l):魔芋精粉20,牛肉蛋白胨8,酵母提取物4,KH2P04 1,MgS04·7H20 0.5;自然pH值。每250ml三角瓶40ml培养基,50℃,200r/min,发酵96h后,离心去菌体所得上清液即为粗酶液。酶活测定采用DNS法,底物溶液为0.5%的槐豆胶(pH6.5,0.05mol/L磷酸盐缓冲液配制),50℃水浴中反应10min。酶活测定为1100U/ml,4℃冷藏备用。
甘露聚糖酶解
取50.0g椰子壳甘露聚糖,加入1L去离子水,煮沸5min,冷却至室温后用0.1mol/L盐酸调节pn值至6.0,加入25ml粗酶液(共含27500U甘露聚糖酶活),50℃,150r/min,水解24h。用0.1mol/L盐酸或NaOH溶液使系统pH值稳定在5.8~6.2。水解结束后沸水浴10min灭酶终止反应。酶解液过滤,滤饼用少量水洗,合并滤液。滤液50℃真空浓缩至约300ml。