显色溶液的制备:2,4-二硝基苯肼(2,4-dinitrophenylhydrazine)试液:称此试剂500mg置于50ml容量瓶中,加H2SO41ml,用甲醇稀释至刻度即得。
10%KOH溶液:称10gKOH置于100ml容量瓶中。加水30ml,用甲醇稀释至刻度即得。
测定法:取标准溶液、样品溶液、甲醇各1 ml分别置10ml容量瓶中,并分别加入2ml的2, 4二硝基苯肼试液,三个容量瓶在水浴中50~55℃下反应50min,用自来水快速冷却后,加KOH溶液至刻度,分别吸取上述三种反应后的溶液1 ml于10ml的具塞试管中,加甲醇10ml混匀,离心10min,上清液分别倾于50ml容量瓶中,离心沉淀再加甲醇10ml混匀,离心,上清液再分别倾于同一50ml容量瓶中,并重复一次,将三个50ml容量瓶均加甲醇至刻度。摇匀,于紫外分光光度计490nm处测定吸光度值。
上式的计算是基于取样操作严格按上述要求进行称量的。如果称量不能达到文中要求